سيل ثقافتن جي ڪرپٽ سرپرست لاء بنيادي طريقا

سيل ثقافتن جي ڪرپٽ سرپرست لاء بنيادي طريقا

عام ترقي جي سرگرمين دوران پنهنجي ميٽابولزم کي جاري رکيو، جنهن کي مختلف احتجاج جي شرڪت جي ضرورت آهي. جڏهن درجه حرارت هيٺ -70 ° C کان گهٽ آهي، پرواهه ڪم ڪرڻ بند ڪري ٿو. ان،، عام طور تي ماحول ۾ ماحول ۾، سيلا پنھنجي ميٽن واري حرڪت کان روڪي سگھن ٿا ۽ هڪ ڊرام ڪاري رياست کي داخل ڪري سگهن ٿا.

1. تجرباتي مواد

بنيادي مواد:

بنيادي ثقافت وچولي

سيرم (روايتي ايف بي ايس / اين بي ايس)

الٽراپچر ورڪ برنچ

جراثيم واري مديٿيل سلفڪسائڊ (ڊي ايم ايس او)

جراثيم پي بي ايس فاسفٽ بفر جو لوڻ حل

بندوق ڏيڻ

بجليء جو پائليٽنگ بندوق

تجربن جي تياري

هڪ) منجمد حل جي تياري:

عام خانا: 55 سيڪڙو بنيادي وچولي + 40 سيڪڙو بووين سيرم (ايف بي ايس / اين بي ايس) + 5٪ DMSSO

اهم سيلز: 90 سيڪڙو بووين سيرم (ايف بي ايس / اين بي ايس) + 10٪ DMSO

هڪ 15 ايم ايل سينٽيپروزر حل کي 15 ايم ايل سينٽريفيوج ٽيوب ۾ حل ڪيو ويو، بعد ۾ (quest] ۽ بعد ۾ استعمال لاء 4 ° C تي 4 ° C تي.

(ب) سيلز کي منجهيل بڻائڻ لاء:

خانن کي منجمد ڪرڻ کان پهريان، سيلز کي سٺي ترقي واري جڳهه ۽ منطقي حالت ۾ تبديل ڪريو

2. تجرباتي طريقيڪار

1. منزلن جي کثافت جو مشاهدو ڪيو، جيڪو 80٪ ~ 90٪ آهي. پراڻن وچولي کي گڏ ڪرڻ لاء پائليٽ بندوق استعمال ڪريو، سيرل پي بي ايس کي 1-2 دفعا واڪ ڌوئڻ لاء، ۽ ڪلچر جي ماحول ۾ باقي ميڊيم کي هٽايو.

2. ٽرپپينن يا هضم جو رس جو هڪ مناسب جوس شامل ڪرڻ جي اجازت ڏيو ته ٽريپسين کي شامل ڪرڻ جي اجازت ڏيو، ۽ انهن کي هضم ڪرڻ جي لاء انبڪٽر ۾ رک. خوردبيني جي هيٺيان خانن جي حالت جو مشاهدو ڪريو: سائيٽو پلازم کي واپس وٺي رهيو آهي ۽ سيلز هاڻي شيٽن ۾ ڳن not يل ناهن. هن موقعي تي، هضم جو عمل کي روڪڻ لاء اسٽاپ حل شامل ڪريو.

3. نرميء سان سيلز کي هڪ ٽپ سان گڏ هڪ ٽپ سان بلبل کي 3-5 منٽن تائين سيل معطل ڪرڻ جي لاء بلبل ڪيو ويو.

نگران کي رد ڪريو، حل ڪرڻ واري حل کي منجمد حل ڪرڻ، ۽ سورن کي هڪجهڙائي سان ڳڻپ ڪرڻ لاء پائليٽ شامل ڪريو. حتمي کثافت وچين سان گڏ Crypreresered وچولي کي 5 × 106 / ml ~ 107 / ml کي ترتيب ڏيو.

4. متوقع گنجائش مطابق روينجنڪ ٽيوب کي روڪڻ لاء هڪ پائپ گونج جو بندوبست استعمال ڪريو، ۽ ڪئپيٽ مشين کي ڪيپ ۽ مهر تي استعمال ڪريو.

5. معياري روسي سرورز جو پروگرام هڪ ٿڌو شرح آهي -1 ° C / منٽ جي هڪ ٿڌي شرح آهي، ۽ سيلز هيٺين قدمن جي مطابق: 4 ° C (20 منٽ) → - 20 ° C (30min) → -80 ° C (رات جو) مائع نائٽروجن ۾ ڊگھي مدت وارو ذخيرو.

اهو پڻ سڌو سنئون فريزر ۾ محفوظ ڪري سگھجي ٿو -80 ° C رات ۾.

يوگيويو ميڊيڪل هڪ اعلي ٽيڪنالاجي اينڊرپرز آهي، بايوڊيڪل استعمال جي پيداوار ۽ وڪرو ۾ مهارت حاصل ڪرڻ. پائليٽ ٽپس، پائليٽ، پي سي آر پليٽ، سيل ڪلچر پراڊڪٽس ۽ ٻيا حياتياتي ليبارٽري. يوگيويو ميڊيڪل توهان جي اعتماد ۽ چونڊ جي لائق آهي! مشاورت ۾ ڀليڪار!